追求高(gāo)速和無與倫比的分離功能(néng)
為(wèi)提高(gāo)實驗室的效率,我們需要告訴的HPLC,而且也需要高(gāo)速HPLC分析得到(dào)的分析數據必須像傳統HPLC系統中得出的數據一(yī)樣可靠。例如,在高(gāo)速LC中進行的1000個(gè)分析中,其分離度必須保持一(yī)個(gè)很高(gāo)的水(shuǐ)平;對于小(xiǎo)體積樣品進樣,保留時間和峰面積重複性需保持到(dào)一(yī)個(gè)較好的水(shuǐ)平;而且能(néng)夠最大限度地減低(dī)零部件(jiàn)的替換并保持儀器(qì)良好的穩定性。
我們目前已可不依賴高(gāo)壓運行的進行良好的高(gāo)速分離,同時有能(néng)提供之前的快速LC系統未能(néng)提供的高(gāo)精度及可擴展性。
超快的速度及高(gāo)分離效能(néng)
Prominence UFLC系統和新型的反向色譜柱的結合與傳統的HPLC系統相(xiàng)比,速率是其十倍。而且高(gāo)速的樣品進樣機(jī)制可顯著降低(dī)總的分析循環時間。Prominence UFLC的分離度是傳統HPLC的三倍,因此在傳統HPLC中不易分離的樣品在新型的系統中充分分離。
毋庸置疑的高(gāo)精确度—重複性及速率
高(gāo)速LC中的高(gāo)精确度的輸液泵和自(zì)動進樣器(qì)可改善小(xiǎo)體積樣品的重複率,在長(cháng)期穩定性實驗中可取得并保持高(gāo)重複性。Prominence UFLC擁有超高(gāo)基本性能(néng)。
高(gāo)速及高(gāo)分離柱Shim-pack XR-ODS
基于分離、耐久因素以及應用壓力的考量,開(kāi)發出Shim-pack XR-ODS柱。
LC工(gōng)作站 Labsolutions
島津Labsolution軟件(jiàn)提供高(gāo)通(tōng)量、儀器(qì)控制、多(duō)元數據處理以及法規應對等功能(néng),可提供一(yī)個(gè)直觀的、可操作性強的運行環境。
超快速及高(gāo)分離性能(néng)
液相(xiàng)色譜分離速率通(tōng)過應用超細粒徑的分析柱以及增加流動相(xiàng)的流速進而得到(dào)增加。當實際檢測時間減少時,分離循環時間所需的其他因素變的極為(wèi)重要:例如:自(zì)動進樣器(qì)進樣所需時間,梯度延遲時間以及系統調節時間。
Prominence UFLC可提供對于這些因素的解決方式,可大大降低(dī)總分析時間,由此最終可提高(gāo)實驗室的效率。
高(gāo)速LC分析—10倍于傳統LC
以下(xià)是對一(yī)個(gè)新的反相(xiàng)柱—配置了Shim-pack XR-ODS的Prominence UFLC以及配置傳統柱(150mmL. x 4.6mm i.d., 5um)的傳統LC的比較。在傳統LC中,分離度為(wèi)1.2的苯并熒異構體(峰7與8)的洗脫時間為(wèi)35分鍾,而在配置了Shim-pack XR-ODS的Prominence UFLC中的洗脫時間則為(wèi)3.5分鍾,同時還(hái)可保持同樣的優質分辨率。苯并苝(峰9)的保留時間從(cóng)傳統中的50.4分鍾減少到(dào)另一(yī)個(gè)中的5.07分鍾,同時其理論闆數有輕微變化,從(cóng)10,600 到(dào) 11,900。
Prominence UFLC的分析時間減少至傳統LC的1/10,同時還(hái)保持了分離效率。
(根據分離環境不同,分析時間的減少也會(huì)有所不同。)
總分析循環時間減少
在利用高(gāo)速柱進行分析,分析時間減少時,其他影響分析周期的因素變得十分重要,比如自(zì)動進樣器(qì)進樣所需時間,梯度延遲時間以及系統調整時間。如果自(zì)動進樣樣器(qì)進樣時間比較緩慢(màn),則它将占據了總分析循環時間的大部分時長(cháng)。Prominence UFLC内配置了一(yī)個(gè)快速的自(zì)動進樣器(qì)(10秒(miǎo)鍾10uL進樣),提供了極快的分析周期。
就(jiù)總分析時間的例子進行的連續三個(gè)周期的快速分析對比
(假定分析時間:30秒(miǎo);其他快速LC自(zì)動進樣器(qì)進樣活動時間:30秒(miǎo))
一(yī)系列自(zì)動特征:諸如自(zì)動排液,通(tōng)過手動操作縮短啓動時間。在梯度操作時減少色譜柱入口濃度變化的延遲時間;系統調控時間的初始化,UFLC内更小(xiǎo)的系統體積的應用。
超快速梯度分析
以上(shàng)的Prominence UFLC展示了優良的梯度分析。下(xià)圖所示數據為(wèi)一(yī)個(gè)分析周期的30秒(miǎo)左右的高(gāo)速梯度分析。
Prominence UFLC在未應用高(gāo)壓的情況下(xià),通(tōng)過優化系統及柱體效率提供超高(gāo)速和高(gāo)分離。
柱體特征:Shim-pack XR-ODS (30mmL. x 3mm i.d.) 溫度:80°C, 流動相(xiàng):水(shuǐ)/乙腈梯度洗脫液
流速:3.0mL/min
檢測波長(cháng):245nm
樣品:
高(gāo)分離分析—比一(yī)般分離高(gāo)出三倍
盡管Shim-pack XR-ODS擁有較小(xiǎo)的粒徑填料,但壓降(備壓)較小(xiǎo),而且可以使用長(cháng)柱子。因此,在未使分析時間變長(cháng)的基礎上(shàng),可取得高(gāo)分離的具有高(gāo)理論闆數色譜圖,這在以前是從(cóng)未實現過的。下(xià)圖的色譜圖對比了以應用配置了Shim-pack XR-ODS的Prominence UFLC和傳統LC分别進行的苯并熒蒽異構體的分離。Prominence UFLC可提供較短的分析時間以及超高(gāo)的分離率(Rs),同時3倍的理論闆數。
高(gāo)準确度,穩定性及耐久性
優越重複性是HPLC的重要性能(néng),此性能(néng)并不以犧牲高(gāo)速率為(wèi)代價。Prominence UFLC配置了一(yī)個(gè)成熟的微沖程溶劑輸送組件(jiàn)(流速分辨率為(wèi)3.7nL/分., 10uL/沖程),擁有改良的硬件(jiàn)由此可帶來超快的梯度。Prominence自(zì)動進樣器(qì),擁有高(gāo)度密封的測量設備和高(gāo)精密閥,對于快速LC可實現高(gāo)重複性。
小(xiǎo)體積進樣和超快速分析的重複性
對普通(tōng)超快速LC來說,通(tōng)常小(xiǎo)體積進樣的重複性不太好。下(xià)圖和表為(wèi)Prominence UFLC就(jiù)2uL進樣量的色譜圖,一(yī)分鍾的梯度分析重複性RSD小(xiǎo)于0.2%。
柱體特征:Shim-pack XR-ODS (30mmL. x 3mm i.d.) 溫度:80°C, 流動相(xiàng):水(shuǐ)/乙腈梯度洗脫液
流速:1.5mL/分
檢測波長(cháng):245nm
樣品:
(2uL injection, n=6)
對于儀器(qì)控制的精确度,是基于分析驗證過程和質量控制測試要求下(xià)進行的。同時為(wèi)了減少系統故障對分析的影響,最為(wèi)重要的控制因素是自(zì)動進樣器(qì)上(shàng)的高(gāo)壓閥。Prominence UFLC應用島津自(zì)身研發的高(gāo)精度的6通(tōng)閥,在100,000例耐久測試中可達到(dào)小(xiǎo)于0.1%或極小(xiǎo)的面積重複性(RSD)。
除此之外,LC-MS檢測中,樣品殘留量受到(dào)極大的關注。Prominence UFLC通(tōng)過抑制樣品吸附,成功的實現極小(xiǎo)殘留。
島津6通(tōng)閥耐久性實驗數據
在完成100,000次循環耐久測試後的樣品重複性。
Shim-pack XR-ODS
Shim-pack XR-ODS使用2.2um粒徑填料,極為(wèi)巧秒(miǎo)地平衡著(zhe)分離效率和壓力。
Shim-pack XR-ODS柱可以使得高(gāo)速和高(gāo)分離分析在低(dī)于30MPa下(xià)實現,它是島津在常規柱壓條件(jiàn)下(xià)實現高(gāo)速和高(gāo)分離的解決方案。
每一(yī)個(gè)Shim-pack XR-ODS柱擁有三個(gè)質量證書。島津嚴格控制著(zhe)每一(yī)個(gè)色譜柱的質量,依據證書标準生(shēng)産确保色譜柱的一(yī)緻性。
Shim-pack XR-ODS規格
(mm)内徑 | (mm)長(cháng)度 |
2.0 | 30 / 50 / 75 /100 |
3.0 | 30 / 50 / 75 /100 |
4.6 | 30 / 50 / 75 /100 |
對于常規的分析,建議使用3.0mm i.d. 50mm長(cháng)的色譜柱。2.0mm的色譜柱常用于半微量高(gāo)速分析。
PTC氨基酸的應用
柱前衍生(shēng)方式用于氨基酸的分析--通(tōng)過使用PITC(苯基異硫氰酸)試劑使氨基酸衍生(shēng)成PTC(苯氨基硫代甲酰基),并通(tōng)過UV檢測器(qì)檢測。下(xià)圖為(wèi)PTC衍生(shēng)17種種氨基酸中的在4分鍾内分離分析圖。
柱:Shim-pack XR-ODS (75mmL. x 3mm i.d.)
溫度:40℃
流動相(xiàng):磷酸鹽緩沖液/乙腈溶液,梯度洗脫
流速:1.2 mL/min
檢測波長(cháng):254nm
黃豆中大豆異黃酮的分析
大豆異黃酮為(wèi)黃豆中富含的物(wù)質,尤其是大豆胚芽中。由于其類似雌激素的作用,大豆異黃酮引起了廣泛的關注。通(tōng)過梯度洗脫可分析黃豆中的大豆異黃酮。
柱:Shim-pack XR-ODS (75mmL. x 3mm i.d.)
溫度:40℃
流動相(xiàng):甲酸水(shuǐ)溶液/甲酸乙腈溶液,梯度洗脫
流速:1.2 mL/min
檢測波長(cháng):275nm